ẢNH HƯỞNG CỦA KỸ THUẬT PHÂN TÁCH ENZYME LÊN SỐ LƯỢNG VÀ ĐẶC ĐIỂM TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ CÓ NGUỒN GỐC DÂY RỐN NGƯỜI

Trần Trung Thành; Trần Trung Kiên; Nguyễn Thị Ngọc Hà; Vũ Thị Tiến; Hoàng Hoàng Ngân; Nguyễn Trung Nam

doi:10.34238/tnu-jst.13174

ẢNH HƯỞNG CỦA KỸ THUẬT PHÂN TÁCH ENZYME LÊN SỐ LƯỢNG VÀ ĐẶC ĐIỂM TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ CÓ NGUỒN GỐC DÂY RỐN NGƯỜI

Thông tin bài báo

Ngày nhận bài: 04/07/25 Ngày hoàn thiện: 10/01/26 Ngày đăng: 12/01/26

Các tác giả

1. Trần Trung Thành, Viện Sinh học; Học viện Khoa học và Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
2. Trần Trung Kiên, Bệnh viện Phụ sản Hà Nội
3. Nguyễn Thị Ngọc Hà, Viện Sinh học
4. Vũ Thị Tiến, Viện Sinh học
5. Hoàng Hoàng Ngân, Viện Sinh học
6. Nguyễn Trung Nam , Viện Sinh học

Tóm tắt

Phương pháp phân tách có vai trò quan trọng trong việc duy trì ổn định số lượng và đặc tính của tế bào gốc trung mô (MSCs) trong nuôi cấy in vitro. Nghiên cứu này đánh giá ảnh hưởng của trypsin-EDTA, TrypLE và collagenase đến đặc tính tế bào gốc trung mô dây rốn người (hUC-MSCs) ở các mốc thời gian khác nhau. hUC-MSCs được phân lập từ dây rốn và nuôi tăng sinh khoảng 90% mật độ đĩa. Sau đó, tế bào được phân tách bởi các enzyme, và các kết quả được đánh giá qua lượng tế bào, sự sống sót, biểu hiện gen, kiểu hình miễn dịch và biệt hóa tạo xương. Trypsin-EDTA phân tách tế bào đạt hiệu suất cao nhất trong 5 phút, nhưng việc tiếp xúc dài dẫn đến giảm lượng tế bào. TrypLE không có sự khác biệt về hiệu suất thu tế bào từ 5 phút đến 120 phút. Collagenase thu hồi tế bào kém bất kể thời gian. Các tế bào được xử lý bằng trypsin-EDTA giảm biểu hiện CD90. Không có enzyme nào ảnh hưởng đến các gen gốc và biệt hóa xương của hUC-MSCs. Tóm lại, TrypLE có thể thay thế trypsin-EDTA do có khả năng thu hồi tế bào tốt và duy trì các đặc điểm của hUC-MSCs.

Từ khóa

Dây rốn người; Tế bào gốc trung mô; Trypsin-EDTA; TrypLE; Collagenase

Toàn văn:

PDF (English)

Tài liệu tham khảo

[1] V. J. Costela-Ruiz, L. Melguizo-Rodríguez, C. Bellotti, R. Illescas-Montes, D. Stanco, C. R. Arciola, and E. Lucarelli, "Different sources of mesenchymal stem cells for tissue regeneration: a guide to identifying the most favorable one in orthopedics and dentistry applications," International Journal of Molecular Sciences, vol. 23, no. 11, 2022, Art. no. 6356.

[2] E. Semenova, M. P. Grudniak, E. K. Machaj, K. Bocian, M. Chroscinska-Krawczyk, M. Trochonowicz, I. M. Stepaniec, M. Murzyn, K. E. Zagorska, D. Boruczkowski, T. J. Kolanowski, T. Oldak, and N. Rozwadowska, "Mesenchymal stromal cells from different parts of umbilical cord: approach to comparison & characteristics," Stem Cell Reviews and Reports, vol. 17, no. 5, pp. 1780–1795, 2021.

[3] M. Xu, J. Xu, D. Cheng, X. Chen, S. Lin, X. Si, F. Guo, D. Wu, and F. Wu, "Isolation of umbilical cord-derived mesenchymal stem cells with high yields and low damage," Journal of Visualized Experiments, no. 209, 2024, Art. no. e66835.

[4] E. M. Horwitz, K. Le Blanc, M. Dominici, I. Mueller, I. Slaper-Cortenbach, F. C. Marini, R. J. Deans, D. S. Krause, and A. Keating, "Clarification of the nomenclature for MSC: the International Society for Cellular Therapy position statement," Cytotherapy, vol. 7, no. 5, pp. 393–395, 2005.

[5] R. Mahmoud, M. Bassiouny, A. Badawy, A. Darwish, S. Yahia, and N. El-Tantawy, "Maternal and neonatal factors' effects on Wharton's jelly mesenchymal stem cell yield," Scientific Reports, vol. 14, no. 1, 2024, Art. no. 24376.

[6] Y. Jin Y, S. Li, Q. Yu, T. Chen, and D. Liu, "Application of stem cells in regeneration medicine," MedComm (2020), vol. 4, no. 4, 2023, Art. no. e291.

[7] Y. Lim, M. Ma, W. Park, J. Choi, M. Seo, and G. W. Lee, "Fundamental steps for mesenchymal stem cell isolation for experimental research," International Journal of Pain, vol. 15, no. 1, pp. 28–36, 2024.

[8] D. Fong, N. Duceppe, and C. D. Hoemann, "Mesenchymal stem cell detachment with trace trypsin is superior to EDTA for in vitro chemotaxis and adhesion assays," Biochemical and Biophysical Research Communications, vol. 4843, no. 3, pp. 656–661, 2017.

[9] J. Wang, S. Gao, Y. Zhao, T. Fan, M. Zhang, and D. Chang, "Manufacture and quality control of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cell sheets for clinical use," Cells, vol. 11, no. 17, 2022, Art. no. 2732.

[10] R. R. Taghizadeh, K. J. Cetrulo, and C. L. Cetrulo, "Collagenase impacts the quantity and quality of native mesenchymal stem/stromal cells derived during processing of umbilical cord tissue," Cell Transplantation, vol. 27, no. 1, pp. 181–193, 2018.

[11] T. T. Tran, K. T. Tran, D. Kim, and N. T. Nguyen, "Bioactive peptides SL-13R and KS-13 enhance human adipose-derived mesenchymal stem cell proliferation in vitro," Bangladesh Journal of Pharmacology, vol. 19, no. 2, pp. 69–71, 2024.

[12] K. T. Tran, A. D. Pham, T. T. Tran, T. T. Vu, A. H. V. Nguyen, and N. T. Nguyen, "Evaluating the effects of different culture media on the characteristics and growth of mesenchymal stem cells," TNU Journal of Science and Technology, vol. 229, no. 13, pp. 95–101, 2024.

[13] W. Strober, "Trypan blue exclusion test of cell viability," Current Protocols in Immunology, vol. 111, pp. A3.B.1–A3.B.3, 2015.

[14] K. J. Livak and T. D. Schmittgen, "Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-ΔΔC(T)) method," Methods, vol. 25, no. 4, pp. 402–408, 2001.

[15] J. Zhang, J. Zhao, Q. Mao, and H. Xia, "A simple, efficient and economical method for isolating and culturing human umbilical cord blood derived mesenchymal stromal cells," Molecular Medicine Reports, vol. 20, no. 6, pp. 5257–5264, 2019.

[16] S. Kestendjieva, M. Chervenkov, T. Oreshkova, M. Mourdjeva, and E. Stoyanova, "Mesenchymal stromal/stem cells isolated by explant culture method from Wharton’s jelly and subamnion possess similar biological characteristics," Applied Sciences, vol. 14, no. 17, 2024, Art. no. 8036.

[17] C. R. Ogando, G. A. Barabino, and Y. K. Yang, "Adipogenic and osteogenic differentiation of in vitro aged human mesenchymal stem cells," Methods in Molecular Biology, vol. 2045, pp. 107–117, 2019.

[18] K. Tsuji, M. Ojima, K. Otabe, M. Horie, H. Koga, I. Sekiya, and T. Muneta, "Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells," Cell Transplantation, vol. 26, no. 6, 2017, Art. no. 1089.

[19] A. Garg, D. D. Houlihan, V. Aldridge, S. Suresh, K. K. Li, A. L. King, R. Sutaria, J. Fear, R. H. Bhogal, P. F. Lalor, and P. N. Newsome, "Nonenzymatic dissociation of human mesenchymal stromal cells improves chemokine-dependent migration and maintains immunosuppressive function," Cytotherapy, vol. 16, no. 4, pp. 545–559, 2014.

DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.13174

Các bài báo tham chiếu

Hiện tại không có bài báo tham chiếu



Ghi nhớ