TÁI SINH CÂY ĐẬU TƯƠNG CHUYỂN GENE MANG CẤU TRÚC pZY102::GmDREB7A THÔNG QUA CHỌN LỌC BẰNG PHOSPHINOTHRICIN

Nguyễn Thị Hải Yến; Dương Thu Hà; Trần Thị Hồng; Nguyễn Đức Hùng; Chu Hoàng Mậu

doi:10.34238/tnu-jst.7932

TÁI SINH CÂY ĐẬU TƯƠNG CHUYỂN GENE MANG CẤU TRÚC pZY102::GmDREB7A THÔNG QUA CHỌN LỌC BẰNG PHOSPHINOTHRICIN

Thông tin bài báo

Ngày nhận bài: 14/05/23 Ngày hoàn thiện: 08/06/23 Ngày đăng: 16/06/23

Các tác giả

1. Nguyễn Thị Hải Yến, Trường Đại học Khoa học - ĐH Thái Nguyên
2. Dương Thu Hà, Sở Giáo dục và Đào tạo Bắc Giang
3. Trần Thị Hồng, Trường Đại học Sư phạm - ĐH Thái Nguyên
4. Nguyễn Đức Hùng, Trường Đại học Sư phạm - ĐH Thái Nguyên
5. Chu Hoàng Mậu , Trường Đại học Sư phạm - ĐH Thái Nguyên

Tóm tắt

Đậu tương là loại cây trồng mẫm cảm với hạn và mặn, do vậy nghiên cứu biện pháp tăng cường khả năng chống chịu hạn và mặn của cây đậu tương là vấn đề đang được quan tâm. Protein DREB là nhân tố phiên mã làm tăng cường biểu hiện các gene liên quan đến tính chịu hạn và mặn của đậu tương, tuy nhiên đến nay còn nhiều gene DREB ở đậu tương còn chưa rõ chức năng. Nghiên cứu này nhằm tạo cây đậu tương chuyển gene phục vụ đánh giá vai trò của gene GmDREB7 đối với các gene liên quan đến tính chống chịu hạn và mặn của cây đậu tương. Các phương pháp biến nạp di truyền, tái sinh, chọn lọc in vitro và phân tích cây chuyển gene đã được sử dụng để tạo cây đậu tương chuyển gene phục vụ nghiên cứu chức năng của gene GmDREB7. Từ 150 mẫu được biến nạp cấu trúc pZY102::GmDREB7A đã thu được 447 chồi và qua 3 lần sàng lọc bằng phosphonothricin (ppt) đã thu được 17 cây in vitro được chuyển gene GmDREB7A. Nhân dòng in vitro và chọn lọc các cây T0 bằng ppt thu được 8 dòng đậu tương, ký hiệu là T0-1, T0-2, T0-3, T0-4, T0-5, T0-6, T07, T0-8. Kết quả phân tích PCR 8 dòng đậu tương kháng ppt trong nhà lưới thu được 7 dòng dương tính với PCR (T0-1, T0-2, T0-3, T0-4, T0-5, T0-6, T07, T0-8). Các dòng đậu tương chuyển gene GmDREB7A tiếp tục được theo dõi và phân tích ở các thế hệ tiếp theo.

Từ khóa

Biến nạp di truyền; Gene chuyển GmDREB7A;Phosphinothricin; Tái sinh in vitro; Đậu tương chuyển gen

Toàn văn:

PDF

Tài liệu tham khảo

[1] D. L. Tran, Soybean Plant. Hanoi Agricultural Publishing House, 2000.

[2] H. M. Chu, T. T. H. Nguyen, V. T. T. Nguyen, and H. H. Chu, Genes and tolerant characteristics of soybean. VNU Publishing House, 2011.

[3] Q. H. Nguyen, L. T. K. Vu, L. T. N. Nguyen, N. T. T. Pham, Y. T. H. Nguyen, S. V. Le, and M. H. Chu, “Overexpression of the GmDREB6 gene enhances proline accumulation and salt tolerance in genetically modified soybean plants,” Scientific Reports, vol. 9, 2019, Art. no. 19663.

[4] T. N. L. Nguyen, P. Vaciaxa, T. C. Nguyen, H. Q. Nguyen, T. T. N. Pham, T. T. T. Vu, and H. M. Chu, “Characteristics and phylogeny of DREB gene subfamily in soybeans [Glycine max (L.) Meril],” Vietnam Journal of Science, Technology and Engineering, vol. 63, no. 2, pp. 60-64, 2021.

[5] C. Lata and M. Prasad, “Role of DREBs in regulation of abiotic stress responses in plants,” Journal of experimental botany, vol. 62, pp. 4731-4748, 2011.

[6] Q. Jiang, Z. Hu, H. Zhang, and Y. Ma, “Overexpression of GmDREB1 improves salt tolerance in transgenic wheat and leaf protein response to high salinity,” Crop J., vol. 2, pp. 120-131, 2014, doi: 10.1016/j.cj.2014.02.003.

[7] T. T. N. Pham, H. Q. Nguyen, T. N. L. Nguyen, X. T. Dao, D. T. Sy, V. S. Le, and H. M. Chu, “Overexpression of the GmDREB2 gene increases proline accumulation and tolerance to drought stress in soybean plants,” Australian Journal of Crop Science, vol. 14, pp. 495-503, 2020.

[8] M. Chen, Z. Xu, L. Xia, L. Li, X. Chen, J. Dong, Q. Wang, and Y. Ma, “Cold-induced modulation and functional analyses of the DREbinding transcription factor gene, GmDREB3, in soybean (Glycine max L.),” Journal of Experimental Botany, vol. 60, pp. 121-135, 2009.

[9] N. Rahmawati, Rosmayati, D. Delvian, B. Mohammad, and O. Hirosuke, “Evaluation of resistance improvement of soybean (Glycine max (L) Merr.) against salinity using mass selection and gene expression of salinity tolerant,” Proceedings of the International Conference on Natural Resources and Technology (ICONART), 2019, pp. 30-37.

[10] M. S. Homrich, B. Wiebke-Strohm, R. L. Weber, and M. H. Bodanese-Zanettini, “Soybean genetic transformation: A valuable tool for the functional study of genes and the production of agronomically improved plants,” Genet Mol Biol., vol. 35, pp. 998-1010, 2012, doi: 10.1590/s1415-47572012000600015.

[11] National Center for Biotechnology Information, “Dehydration-responsive element binding protein 7 [Glycine max (soybean),” Gene ID: 100101894. [Online]. Available: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/?term=100101894. [Accessed May 10, 2023].

[12] T. Q. Tu, T. M. T. Bui, V. Sysouphanh, T. H. Y. Nguyen, T. N. L. Nguyen, and H. M. Chu, “Generating gene expression construct and agrobacterium-mediated transformation of GmDREB7A in tobacco,” TNU Journal of Science and Technology, vol. 227, no. 10, pp. 17–25, 2022, doi: 10.34238/tnu-jst.6066.

[13] P. M. Olhoft, C. M. Donovan, and D. A. Somers, “Soybean (Glycine max) transformation using mature cotyledonary node explants,” Methods in molecular biology, vol. 343, pp. 385-396, 2001.

[14] T. H. Nguyen, H. M. Chu, H. H. Chu, and V. S. Le, “Study on regeneration and genetic transformation via cotyledons node of two soybean varieties (Glycine max (L.) Merrill) DT12 and DT84 by Agrobacterium,” Vietnamese Journal of Biotechnology, vol. 8, pp. 1305-1310, 2011.

[15] R. Brettschneider, D. Becker, and H. Lörz, "Efficient transformation of scutellar tissue of immature maize embryos," Theoretical and Applied Genetics, vol. 94, pp. 737-748, 1997.

[16] S. L. Dellaporta, J. Wood, and J. B. Hicks, "A plant DNA minipreparation: version II," Plant Molecular Biology Reporter, vol. 1, pp. 19-21, 1983.

DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.7932

Các bài báo tham chiếu

Hiện tại không có bài báo tham chiếu



Ghi nhớ