TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN PECTINASE AspPecA  TỪ Aspergillus niger M13 TRONG Pichia pastoris X33

Phan Thị Thanh Diễm; Nguyễn Đức Huy; Hoàng Tấn Quảng; Phạm Thị Ngọc Lan; Tạ Đặng Ý Vi; Trần Quốc Dung

doi:10.34238/tnu-jst.12613

TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN PECTINASE AspPecA TỪ Aspergillus niger M13 TRONG Pichia pastoris X33

Thông tin bài báo

Ngày nhận bài: 17/04/25 Ngày hoàn thiện: 09/05/25 Ngày đăng: 09/05/25

Các tác giả

1. Phan Thị Thanh Diễm, 1) Trường Đại học Khoa học - Đại học Huế, 2) Trường Đại học Quảng Nam
2. Nguyễn Đức Huy, Viện Công nghệ sinh học - Đại học Huế
3. Hoàng Tấn Quảng, Viện Công nghệ sinh học - Đại học Huế
4. Phạm Thị Ngọc Lan, Trường Đại học Khoa học - Đại học Huế
5. Tạ Đặng Ý Vi, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Huế
6. Trần Quốc Dung , Trường Đại học Sư phạm - Đại học Huế

Tóm tắt

Mục tiêu của nghiên cứu này là tạo dòng và biểu hiện gen mã hóa pectinase (AspPecA) từ Aspergillus niger M13 trong nấm men Pichia pastoris X33 và ứng dụng pectinase tái tổ hợp vào quá trình chế biến dịch quả. Chủng A. niger M13 phân lập từ vỏ bưởi Da Xanh (Citrus maxima) được phục hồi bằng cách nuôi cấy trong Potato Dextrose Broth (PDB) ở 35 ℃, 18-20 giờ. Gen AspPecA được tạo dòng vào vector pPICZαA và được biểu hiện trong P. pastoris X33 với promoter AOX1. Các thể biến nạp P. pastoris X33 biểu hiện pectinase tái tổ hợp được chọn lọc trên đĩa agar và khả năng sản xuất pectinase của chúng được đánh giá trong nuôi cấy flask. Pectinase tái tổ hợp rAspPecA có trọng lượng phân tử xấp xỉ 42 kDa, có khả năng làm trong nước ép quả táo. rAspPecA nồng độ 2.400 U/L đã làm giảm độ đục của nước ép quả táo lên đến 29%. Các kết quả thu được từ nghiên cứu này cung cấp cơ sở khoa học cho việc phát triển ứng dụng pectinase tái tổ hợp trong các lĩnh vực công nghệ sinh học khác nhau.

Từ khóa

Nấm mốc Aspergillus niger; Gen AspPecA; Làm trong nước quả; Nấm men Pichia pastoris; Pectinase tái tổ hợp

Toàn văn:

PDF (English)

Tài liệu tham khảo

[1] Y. Guan, D. Wang, C. Lv et al., "Archives of microbiology: screening of pectinase-producing bacteria from citrus peel and characterization of a recombinant pectate lyase with applied potential," Archives of Microbiology, vol. 202, no. 5, pp. 1005-1013, 2020.

[2] S. Haile, C. Masi, and M. Tafesse, "Isolation and characterization of pectinase-producing bacteria (Serratia marcescens) from avocado peel waste for juice clarification," BMC Microbiol., vol. 22, no. 1, 2022, doi: 10.1186/s12866-022-02536-8.

[3] S. Shrestha, M. S. Rahman, and W. Qin, "New insights in pectinase production development and industrial applications," Applied Microbiology and Biotechnology, vol. 105, no. 24, pp. 9069-9087, 2021.

[4] V. Priya and V. Sashi, "Pectinase enzyme producing microorganisms," International Journal of Scientific and Research Publications, vol. 4, no. 3, pp. 1-4, 2014.

[5] B. Saoudi, A. Habbeche, B. Kerouaz, et al., "Purification and characterization of a new thermoalkaliphilic pectate lyase from Actinomadura keratinilytica Cpt20," Process Biochemistry, vol. 50, no. 12, pp. 2259-2266, 2015.

[6] P. Thakur and G. Mukherjee, "Utilization of agro-waste in pectinase production and its industrial applications," in Recent Developments in Microbial Technologies, R. Prasad, V. Kumar, J. Singh, et al., ed., Singapore: Springer Nature Singapore, 2021, pp. 145-162.

[7] S. Shrestha, C. Chio, X. Zhang, et al., “Cloning and expression of pectinase gene from two forest soil bacteria, Streptomyces sp.,” The Microbe, vol. 1, pp. 1-8, 2023.

[8] C. Zhou, Y. Xue, and Y. Ma, "Cloning, evaluation, and high-level expression of a thermo-alkaline pectate lyase from alkaliphilic Bacillus clausii with potential in ramie degumming," Applied Microbiology and Biotechnology, vol. 101, no. 9, pp. 3663-3676, 2017.

[9] Y. Yuan, X. Y. Zhang, Y. Zhao, et al., "A novel PL9 pectate lyase from Paenibacillus polymyxa KF-1: Cloning, expression, and its application in pectin degradation," Int. J. Mol. Sci., vol. 20, pp.1-17, 2019.

[10] T. X. Ngo, T. H. Mai, and V. T. Vu, "Cloning and over Expression of an Aspergillus niger XP Phytase Gene (phyA) in Pichia pastoris," World Academy of Science, Engineering and Technology, vol. 32, pp. 383-386, 2009.

[11] S. Srivastava and S. K. Tyagi, "Effect of enzymatic hydrolysis on the juice yield from apple fruit (Malus domestica) pulp," International Journal of Biotechnology and Bioengineering Research, vol. 4, pp. 299-306, 2013.

[12] Z. Zhang, J. Dong, D. Zhang, et al., "Expression and characterization of a pectin methylesterase from Aspergillus niger ZJ5 and its application in fruit processing," Journal of Bioscience and Bioengineering, vol. 126, no. 6, pp. 690-696, 2018.

[13] L. Zhong, X. Wang, L. Fan, et al., "Characterization of an acidic pectin methylesterase from Paenibacillus xylanexedens and its application in fruit processing," Protein Expr. Purif., vol. 179, 2021, Art. no. 105798, 10.1016/j.pep.2020.105798.

[14] S. X. Xu, X. Qin, B. Liu, et al., "An acidic pectin lyase from Aspergillus niger with favourable efficiency in fruit juice clarification," Lett. Appl. Microbiol., vol. 60, no.2, pp. 181-187, 2015.

[15] D. Abdulrachman, P. Thongkred, K. Kocharin, et al., "Heterologous expression of Aspergillus aculeatus endo-polygalacturonase in Pichia pastoris by high cell density fermentation and its application in textile scouring," BMC Biotechnol., vol. 17, no.1, 2017, doi: 10.1186/s12896-017-0334-9.

[16] A. C. Famotemi, S. O. Kareem, F. Oluwafemi, et al., "Purification and characterization of pectinase from Aspergillus niger strain F7-02 mutant," International Journal of Advanced Research in Biological Sciences, vol. 8, pp. 45-57, 2021.

[17] A. Dhayalan, N. Thillainathan, B. Velramar, et al., "Pectinase from a fish gut bacterium, Aeromonas guangheii (SS6): Production, cloning and characterization," The Protein Journal, vol. 41, no.6, pp. 572-590, 2022.

[18] A. M. Moharram, A-N. A. Zohri, A. E-L Hesham, et al., "Production of cold-active pectinases by three novel Cladosporium species isolated from Egypt and application of the most active enzyme," Scientific Reports, vol. 12, no.1, 2022, Art. no. 15599.

[19] K. Sudeep, J. Upadhyaya, D. R. Joshi, et al., "Production, characterization, and industrial application of pectinase enzyme isolated from fungal strains," Fermentation, vol. 6, no. 2, pp. 1-10, 2020.

[20] T. H. Phan and T. T. S. Nguyen, "Study on application of pectinase enzyme in the production of bottled apricot juice," in Proc. of the Scientific Conf., Food Technology Division, University of Food Industry, Ho Chi Minh City, pp. 124-134, 2015.

"Times New Roman",serif;mso-fareast-font-family:"Times New Roman";mso-ansi-language:

PT-BR;mso-fareast-language:EN-US;mso-bidi-language:AR-SA'>

style='mso-element:field-end'>

DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.12613

Các bài báo tham chiếu

Hiện tại không có bài báo tham chiếu



Ghi nhớ