THIẾT KẾ VECTOR CRIPRS/CAS9 ĐỊNH HƯỚNG BẤT HOẠT GEN CIF1  Ở CÀ CHUA

Đào Quang Hà; Nguyễn Thị Bích Ngọc; Huỳnh Thị Thu Huệ

doi:10.34238/tnu-jst.4883

THIẾT KẾ VECTOR CRIPRS/CAS9 ĐỊNH HƯỚNG BẤT HOẠT GEN CIF1 Ở CÀ CHUA

Thông tin bài báo

Ngày nhận bài: 11/08/21 Ngày hoàn thiện: 20/09/21 Ngày đăng: 06/10/21

Các tác giả

1. Đào Quang Hà, Viện Nghiên cứu Hệ gen - Viện hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
2. Nguyễn Thị Bích Ngọc, Viện Nghiên cứu Hệ gen - Viện hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
3. Huỳnh Thị Thu Huệ , Viện Nghiên cứu Hệ gen - Viện hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam; Học viện Khoa học và Công nghệ - Viện hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam

Tóm tắt

Quả cà chua (Solanum lycopersicum) là một loại thực phẩm giàu chất dinh dưỡng có chứa nhiều hợp chất thứ cấp khác nhau, cũng như nhiều lợi ích đối với sức khỏe. Hàm lượng đường trong quả cà chua được kiểm soát một phần thông qua việc điều hòa và phân hủy lượng đường sucrose trong quá trình đậu trái và phát triển quả. Enzyme phân hủy vách tế bào (CWI) thủy phân sucrose thành monosaccharide và vận chuyển vào tế bào chất, đồng nghĩa với hàm lượng đường trong cà chua được điều chỉnh bởi CWI. Trong khi đó, do sự ức chế gen này được gây ra bởi một sản phẩm của gen CIF1, việc bất hoạt gen CIF1 có thể tăng cường tổng hợp đường trong cà chua. Hiện nay, hệ thống CRISPR/Cas9 là công nghệ hiện đại, có ứng dụng rộng rãi và độ chính xác cao trong chỉnh sửa gen. Trong nghiên cứu này, các gRNA thích hợp cho gen CIF1 được thiết kế để xây dựng các cấu trúc biểu hiện. Hệ thống biểu hiện này trong plasmid pRGEB31-CIF1G2 đã được đưa vào chủng Escherichia coli DH10B. Sau đó, vector mang hệ thống biểu hiện này đã được chuyển thành công vào chủng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens EHA105. Các dòng A. tumefaciens chứa vector pRGEB31-CIF1G2 có thể được sử dụng để tạo các dòng cà chua Tiny-Tim chỉnh sửa gen mang các đặc điểm mong muốn.

Từ khóa

Cà chua; CRISPR/Cas9; CIF1; gRNA; Vector chuyển gen

Toàn văn:

PDF (English)

Tài liệu tham khảo

[1] J. N. Davies and R. J. Kempton, “Changes in the individual sugars of tomato fruit during ripening,” Science of Food and Agriculture, vol. 26, pp. 1103-1110, 1975.

[2] C. Davies and S. P. Robinson, “Sugar accumulation in grape berries (cloning of two putative vacuolar invertase cDNAs and their expression in grapevine tissues),” Plant Physiology, vol. 111, no. 1, pp. 275-283, 1996.

[3] J. N. Davies and G. E. Hobson, “The constituents of tomato fruit--the influence of environment, nutrition, and genotype,” Crit. Rev. Food Sci. Nutr., vol. 15, pp. 208-280, 1981.

[4] G. Qin, Z. Zhu, W. Wang, J. Cai, Y. Chen, L. Li, and S. Tian, “A tomato vacuolar invertase inhibitor mediates sucrosemetabolism and influences fruit ripening,” Plant Physiol., vol. 172, no. 3, pp. 1596-1611, 2016.

[5] T. Rausch, S. Greiner, and M. LinkIn, “Arabidopsis thaliana, the invertase inhibitors AtC/VIF1 and 2 exhibit distinct target enzyme specificities and expression profiles,” FEBS Letter, vol. 573, pp. 105-109, 2004.

[6] Y. Jin, D. Ni, and Y. Ruan, “Posttranslational elevation of cell wall invertase activity by silencing its inhibitor in tomato delays leaf senescence and increases seed weight and fruit hexose level,” Plant Cell, vol. 21, no. 7, pp. 2072-89, 2009.

[7] J. J. Doyle and J. L. Doyle, “Isolation of plant DNA from fresh tissue,” Focus, vol. 12, no. 1, pp. 13-15, 1990.

[8] T. Su, S. Wolf, M. Han, H. Zhao, H. Wei, S. Greiner, and T. Rausch, “Reassessment of an Arabidopsis cell wall invertase inhibitor AtCIF1 reveals its role in seed germination and early seedling growth,” Plant Mol. Biol., vol. 90, no. 1-2, pp. 137-155, 2016.

[9] N. Zhang, J. Jiang, Y. Yang and Z. Wang, “Functional characterization of an invertase inhibitor gene involved in sucrose metabolism in tomato fruit,” J. Zhejiang Univ. Sci., vol. 16, no. 10, pp. 845-856, 2015.

DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.4883

Các bài báo tham chiếu

Hiện tại không có bài báo tham chiếu



Ghi nhớ