THIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN KHÁNG NGUYÊN CD2V CỦA  VIRUS TẢ LỢN CHÂU PHI TRÊN HỆ THỐNG BACULOVIRUS– TẾ BÀO CÔN TRÙNG SỬ DỤNG KIT GÂY ĐỘT BIẾN ĐỊNH HƯỚNG Q5

Nguyễn Thu Giang; Trần Ngọc Lân; Nguyễn Thị Thu Hiền; Lê Thị Thanh; Phạm Bích Ngọc

doi:10.34238/tnu-jst.9236

THIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN KHÁNG NGUYÊN CD2V CỦA VIRUS TẢ LỢN CHÂU PHI TRÊN HỆ THỐNG BACULOVIRUS– TẾ BÀO CÔN TRÙNG SỬ DỤNG KIT GÂY ĐỘT BIẾN ĐỊNH HƯỚNG Q5

Thông tin bài báo

Ngày nhận bài: 15/11/23 Ngày hoàn thiện: 05/01/24 Ngày đăng: 03/02/24

Các tác giả

1. Nguyễn Thu Giang, Viện Công nghệ sinh học - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
2. Trần Ngọc Lân, Trường Đại học Khoa học và Công nghệ Hà Nội
3. Nguyễn Thị Thu Hiền, Viện Công nghệ sinh học - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
4. Lê Thị Thanh , Viện Công nghệ sinh học - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam
5. Phạm Bích Ngọc, Viện Công nghệ sinh học - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam

Tóm tắt

Virus tả lợn Châu Phi (ASFV) là nguyên nhân gây ra tả lợn Châu Phi - một trong những bệnh truyền nhiễm nguy hiểm nhất ở lợn với tỷ lệ tử vong 100%. Tuy nhiên, hiện nay vẫn chưa có vắc xin được cấp phép cho phòng, chống ASFV. CD2v, một glycoprotein ở lớp vỏ ngoài của ASFV, đóng vai trò quan trọng trong quá trình lây nhiễm virus và giảm miễn dịch ở vật chủ, là kháng nguyên tiềm năng để phát triển vắc xin tiểu đơn vị phòng ASFV. Trong nghiên cứu này, trình tự CD2v của chủng VNUAHY-ASFV/Vietnam2019 được tối ưu mã cho biểu hiện trên hệ thống baclovirus - tế bào côn trùng và đặt tổng hợp nhân tạo trong vector pUC57. Toàn bộ cấu trúc CD2vFull-Foldon-His được cắt nối vào vector pLIB để tạo vector tái tổ hợp pLIB-CD2vFull-Foldon-His. Vector pLIB-CD2vFull-Foldon-His được dùng làm khuôn để thiết kế vector pLIB-CD2vED-Foldon-His mang trình tự biểu hiện vùng ngoại bào của CD2v dạng trimer bằng kit gây đột biến định hướng Q5 dựa trên phản ứng PCR với enzyme Polymerase ADN Q5 High-Fidelity. Vector pLIB-CD2vED-Foldon-His được dùng để thiết kế vector pLIB-CD2vED-His cho biểu hiện CD2vED dạng monomer bằng bộ kit Q5. Hai vector pLIB-CD2vED-Foldon-His và pLIB-CD2vED-His được biến nạp vào E. coli DH10Bac để tạo bacmid tái tổ hợp cho biểu hiện kháng nguyên CD2v trên hệ thống baculovirus - tế bào côn trùng, định hướng sản xuất vắc xin phòng ASF.

Từ khóa

Virus gây tả lợn Châu Phi; Vùng ngoại bào của CD2v; Kit gây đột biến định hướng Q5; Baculovirus; Tế bào côn trùng

Toàn văn:

PDF

Tài liệu tham khảo

[1] S. Liu, P. Ding, Y. Du et al., "Development and characterization of monoclonal antibodies against the extracellular domain of African swine fever virus structural protein, CD2v," Frontiers in Microbiology, vol. 2018, no. 1125, pp. 1–10, 2022.

[2] J. M. Argilaguet, E. Perez-Martın, M. Nofrarıas et al., "ADN Vaccination Partially Protects against African Swine Fever Virus Lethal Challenge in the Absence of Antibodies," PLoS ONE, vol. 7, no. 9, pp. 1–11, 2012.

[3] N. Jia, Y. Ou, Z. Pejsak et al., "Roles of African swine fever virus structural proteins in viral infection," Journal of Veterinary Research (Poland), vol. 61, no. 2, pp. 135-143, 2017.

[4] D. P. Núñez, E. G. Urdiales, M. M. Bonet et al., "CD2v interacts with Adaptor Protein AP-1 during African swine fever infection," PLoS ONE, vol. 10, no. 4, pp. 1–19, 2015.

[5] F. R. Gonzalvo, F. R. Guez, and J. M. Escribano, "Functional and Immunological Properties of the Baculovirus-Expressed Hemagglutinin of African Swine Fever Virus," Virology, vol. 289, no. 218, pp. 285–289, 1996.

[6] P. L. Monteagudo, A. Lacasta, and E. López, "BA71∆CD2: a New Recombinant Live Attenuated African Swine Fever Virus with Cross-Protective Capabilities," Journal of Virology, vol. 91, no. 21, pp. 1-17, 2017.

[7] J. M. Argilaguet, E. P. Martín, and S. López, "BacMam immunization partially protects pigs against sublethal challenge with African swine fever virus," Antiviral Research, vol. 98, no. 1, pp. 61-65, 2013.

[8] A. C. Chambers, M. Aksular, and L. P. Graves, "Overview of the Baculovirus Expression System," Current Protocols in Protein Science, vol. 91, no. 1, pp. 541-546, 2018.

[9] K. Zhang, X. Yin, and K. Shi, "A high-efficiency method for site-directed mutagenesis of large plasmids based on large ADN fragment amplification and recombinational ligation," Scientific Reports, vol. 11, no. 1, pp. 1-16, 2021.

[10] Y. Tao, S. V. Strelkov, V. V. Mesyanzhinov et al., "Structure of bacteriophage T4 fibritin : a segmented coiled coil and the role of the C-terminal domain," Structure, vol. 5, no. 6, pp. 789-798, 1997.

DOI: https://doi.org/10.34238/tnu-jst.9236

Các bài báo tham chiếu

Hiện tại không có bài báo tham chiếu



Ghi nhớ