TINH SẠCH VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA KHÁNG NGUYÊN P54 TÁI TỔ HỢP CỦA VIRUS GÂY BỆNH TẢ LỢN CHÂU PHI (AFRICAN SWINE FEVER VIRUS) BIỂU HIỆN TRÊN CÂY THUỐC LÁ Nicotiana benthamina

Tóm tắt

Dịch tả lợn Châu Phi là bệnh truyền nhiễm nguy hiểm do ASFV (African swine fever virus) gây ra trên lợn với tỉ lệ chết lên đến 100%. Hiện nay, chưa có vaccine thương mại nào chính thức được cấp phép phòng ASFV và được bán trên thị trường. p54 được xem là một trong những protein mục tiêu chính để phát triển vaccine phòng chống và sản xuất kit chẩn đoán ASFV. Trong nghiên cứu này, trình tự ectodomain p54 của chủng VNUAHY-ASFV/Vietnam2019 được tối ưu mã biểu hiện trên Nicotiana benthamiana, sau đó được tổng hợp nhân tạo và chèn vào vector pRTRA có chứa các motif trimer, oligomer. Toàn bộ các cassette biểu hiện protein được chèn vào vector pCB301 và biến nạp thành công vào Agrobacterium tumefaciens để biểu hiện tạm thời trên thuốc lá. Biểu hiện của protein p54 tái tổ hợp được đánh giá bằng Western blot. Lựa chọn motif biểu hiện tốt hơn để tinh sạch bằng sắc kí ái lực, gây đáp ứng miễn dịch trên chuột và đánh giá hiệu giá kháng thể IgG đặc hiệu ASFV bằng ELISA. Lựa chọn p54-pII-tp tinh sạch và gây đáp ứng miễn dịch trên chuột. Kết quả ELISA cho thấy p54-pII-tp kích thích sinh kháng thể đặc hiệu với ASFV trên chuột thí nghiệm. Kết quả trên là tiền đề cho các nghiên cứu vaccine tiểu đơn vị và kit chẩn đoán phòng chống sự lây nhiễm ASFV trên Nicotiana benthamiana.